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生化项目反复失控,究竟是何原因导致?

作者:浙江省人民医院 夏骏

作者:桐乡市第四人民医院 周芳静




案例分析


同事反应,这些天每天早上一台生化仪ADA项目总是失控,而且两个水平质控结果都远远低于质控靶值,但重做一遍后又在控了。非常有规律的现象,但不知道什么原因?


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那么让我们先来捋一捋事情经过,初步排查一下:


1. ADA质控品是本实验室自制,是否是质控品不稳定和瓶间差导致的呢?


实验室其他系统ADA质控没有这个现象,所以排除质控品不稳定的嫌疑。至于瓶间差问题,连续几天这样规律出现,可能性不大。


2. 实验室目前采用的是智能化质控方式,每天第一遍ADA质控自动完成。质控品是前一天放入冰箱的,那会不会是这种方式导致质控品出现某种不均一,检测出现偶然误差呢?


以前的确有其他项目出现过偶然误差导致失控,但一个项目连续出现,也不太可能。


3. 再看看我们在第一遍失控后到底怎么处理的。


询问发现,我们同事并非只是简单重新拿了一支质控重做一遍,而是在这个之前做了一个非常关键的处理:重做了一遍水空白!


“水空白”其实就是试剂空白,AU系列全自动生化分析仪有一个专门的蓝色架用来做水空白。用去离子水为样本重复项目检测过程,将各个时间点OD值记录下来。它的结果反应了试剂空白和所用试剂的质量,并且在标本测定结果计算时,这部分空白结果需要被减去。


4. 这几次ADA水空白结果有什么规律地方么?


我们工作流程是在下午更换好试剂后会做一遍水空白,这几次失控后早上同事会重复一遍ADA水空白,每次水空白检测重复4次。规律就是:“下午项目一起做,早上重复单独做。”


调出水空白反应曲线发现,下午ADA水空白结果高于早上单独做的,而且4次重复检测中第1次明显异常:


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图1 四次中第一次水空白结果明显偏高

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图2 后面几次水空白恢复正常


显然,问题锁定在了做水空白时的“携带污染”。

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下面要思考两个问题:

污染从哪里来?污染怎么来?




思考经过




从哪里来?既然水空白反应的是试剂情况,显然极大可能来源于试剂。



ADA检测前一个项目是同型半胱氨酸(HCY),翻了翻试剂说明书,看到HCY试剂主要组成成分:


试剂1(R1) 腺苷甲硫氨酸(SAM) 0.1mmol/L、NADH 0.2 mmol/L、三乙羧乙基膦(TCEP)0.5mmol/L。


试剂2(R2) α-酮戍二酸 5.0mmol/L、HCY甲基转移酶5.0 KU/L、谷氨酸脱氢酶 10 KU/L、S-腺苷同型半胱氨酸水解酶3.0 KU/L、腺苷脱氨酶  5.0KU/L。




天哪,试剂中ADA浓度是正常人血清浓度上千倍啊!问题源头果然藏在此处。于是赶紧将两个项目分配到内外不同圈。


怎么来?携带污染我们一般会首先考虑搅拌棒。有经验的老师知道搅拌棒用的时间久了,清洗能力会下降,甚至其表面涂层有不同程度的脱落导致清洗不彻底。于是观察搅拌棒,我们进行了更换。


当然,这个案例更主要原因还是两个项目不应该分配紧挨在一起,HCY试剂中的ADA浓度远远高于血清中浓度。

最终问题解决,探案结束,来个总结:


1. 当生化项目失控了怎么办?重做质控?校准?其实最重要的是查找失控原因,看曲线、看空白、寻找规律性变化。


2. 生化试剂种类繁多,成分复杂。我们在设置试剂位置和检测顺序的时候一定要考虑到各种可能存在的干扰、污染因素。这次发现HCY对ADA有干扰,通过改变试剂位置的方法来解决问题。其他例如脂类(T-C、TG、HDL-C等)试剂中含有胆酸盐,对TBA会有影响。所以当增加新项目或试剂变化时要特别关注试剂的组成成分。


3. 生化分析仪共用部分(反应杯、试剂针、搅拌棒等)清洗不彻底,会造成携带污染,进而影响检测结果的准确性,定期对仪器进行保养是保证检验结果准确性的必要手段之一。


总之,遇到问题了要去查找问题的原因,解决问题才是王道!



来源:妙毕生化

转载自检验医学网


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