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本文转载自检验医学网
核酸检测到底咋工作？
“单阳结果几率一般比较小。”从事核酸检测设备研发和产业化工作的西安交通大学教授、天隆科技创始人彭年才告诉科技日报记者，在核酸检测中，是用荧光来报告究竟是否阳性，不同颜色的荧光代表一个靶标，“单阳”意味着当时只有一种荧光进行了“报警”。 在《新型冠状病毒肺炎防控方案（第八版）》中，明确对新冠病毒样本采集和检测技术指南（以下简称指南）进行了规定：实验室进行核酸检测的方法采用“实时荧光RT-PCR”方法检测新冠病毒核酸。
那么，为什么新冠病毒的核酸一来，就能发荧光？ 指南中指定了特殊的匹配“引物”，是针对新冠病毒基因组中特有基因设计的（选用两种新冠病毒报告基因：开放读码框1ab和核壳蛋白）。引物就像“卧底”，去和“敌人”新冠病毒“对暗号”，一对上就激发荧光。
《新型冠状病毒肺炎防控方案（第八版）》文件截图 荧光微弱，为了避免误测，荧光PCR设备通过实时监测核酸扩增过程中目标荧光上升的曲线规律（被称为Ct值），如果规律与标准品（新冠阳性）比对符合特征，就报告阳性。 两个靶标，意味着在这个侦查体系中，派了两个“卧底”。 “单阳”是不是报告错了？
但从结果上看，“单阳”意味着两个“卧底”给了截然不同的答案，一个阳性，一个阴性。 这个“分裂”的答案是不是因为检测体系出了问题？ 彭年才认为不太可能。他表示，针对自动化的核酸提取检测过程中可能出现的交叉污染、温度边缘效应、荧光检测通道串扰等多个难题，国内的领头企业和研发团队已经研制出了具有核心专利的技术，也在美国、欧盟等获得了专业认证。 在核酸检测的质量控制方面，指南中规定，中国疾控中心每年至少开展一次对省级疾控机构实验室的质控考核，并同时提供全国新冠病毒实验室检测质控方案。在临床标本检测前，实验室也会对核酸提取试剂、提取仪、扩增试剂、扩增仪等组成的检测系统进行验证才会使用。 具体到大规模人群筛查时，指南明确规定，一旦出现阳性结果，应对阳性标本采用另外1-2种更为灵敏的核酸检测试剂对原始标本进行复核检测，复核阳性方可报出。 可见，核酸检测结果在技术与设备、实验室考核、复核等方面有着“三保险”。 “单阳”是不是阳性？ 单阳”究竟是不是核酸阳性，需要进一步的研究、验证和专家共识。目前大多数厂家都已针对该情况，提出了相应的解决方案，即主要通过复检的方案来最终确定样本的阳性与否，进而提高检测的准确性。 指南中也对“病例确认”做出规定：如果出现单个靶标阳性的检测结果，则需要重新采样，重新检测。当两种标本实时荧光RT-PCR同时出现单靶标阳性，或同种类型标本2次采样检测中均出现单个靶标阳性的检测结果，可判定为阳性。
造成实验室检测单基因阳性的原因有哪些？
单基因阳性结果的出现与多方面因素有关，包括核酸提取方法、核酸提取纯度、检测样本类型以及样本取样操作规范性以及实验室污染等因素有关。 来源：科技日报、德安实验诊断 |
