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SOP文件 | 血清铁蛋白测定操作规程及临床意义

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目的: 
定量检测血清中铁蛋白浓度
范围:
检验科免疫实验室
责任人: 
免疫实验室专业组长及工作人员
应用仪器:
全自动微粒子化学发光免疫分析系统
检测原理:
Access 铁蛋白检测采用双位点酶免法检测 (“双抗体夹心法”)。样品、标记了碱性磷酸酶的羊抗铁蛋白抗体(酶结合物)以及包被了羊抗大鼠、大鼠抗铁蛋白抗体复合物的磁性颗粒被一起加入到反应管中,样品中的铁蛋白和固相在磁性颗粒表面的抗体以及游离的酶结合物在不同的抗原位点上同时发生反应。而后,反应管被传送到磁性分离区域进行多次冲洗,去处未和固相结合的其它成分。最后在反应管中加入化学发光底物(Lumi-Phos* 530已与固相结合的碱性磷酸酶会使该底物发出光子并被光电比色计所检测。最后,对照仪器中储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品铁蛋白的对应关系而计算出样品中的铁蛋白浓度,反应产生的光子与样品中铁蛋白的含量成正比。
标本收集:
1、最好使用新鲜血清样本,如需保存,可置2-8冷藏48小时或-20℃冷冻4周。
2、避免使用溶血、浑浊或脂血样本及反复冻融样本。
:
铁蛋白的定标品提供了六个浓度,0和大概10, 50, 200, 500, a1500 ng/ml (mg/l) ,由人肝脏铁蛋白通过称重法参考WHO第一届国际标准委员会对于铁蛋白标准品的要求(IRP 80/578)配置而成。定标曲线有效期为28天。
操作规程:
1.在装入仪器前,将试剂轻轻的颠倒混匀几次,不要颠倒已用试剂,通过轻轻旋转的方式混匀试剂。
2.每次测试使用25mI的样品,但要考虑到样品杯和样品管的死体积。
3.样品可在可报告范围内被准确的定量(可报告范围约为0.2-1500 ng/ml)。如果样品中的含量超过可报告范围上限时,报结果为> 1500 ng/ml,如果样品浓度低于检测线性的低值,报告结果为<0.2 ng/ml
4.不要重新使用在仪器内已存放1小时以上的标本进行检测。
5.结果应与病人所有的临床表现联系在一起,包括临床病史,其它检测结果和其它合适信息
参考范围:
23.9--336.2 ng/mL
临床意义:
血清铁蛋白是体内含铁量最丰富的一种蛋白质,分子量约450Kd,其中含铁17-23%,是铁的主要储存形式之一,几乎所有真核细胞都含有铁蛋白。Fe2+在肠黏膜细胞内氧化成三价,刺激核糖体合成无铁铁蛋白,并与肠黏膜中的Fe3+结合形成铁蛋白,储存在肝、脾、骨髓及肠黏膜细胞中,是网状内皮系统储铁的主要形式,周围血中循环铁蛋白则来自网状内皮系统的主动分泌或网状内皮细胞死亡的被动释放。测定血清铁蛋白是判断体内铁储存量的重要指标。在诊断缺铁性贫血。铁负荷过度,营养状况调查都有血清铁增高重要意义,同时铁蛋白作为一种肿瘤标志物,如原发性肝癌、肺癌、白血病等,对临床某些恶性肿瘤的诊断也具有一定的价值。


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