随着核酸检测大规模的应用，其检测原理和概念也越来越被社会熟知。近期小编发现，部分科普文中出现“若Ct值大于35，理论上起始模板拷贝数小于1，可认为检测结果无意义”的说法，这种说法是否正确呢？回答这个问题之前，小编想再次谈谈核酸检测中Ct值的应用及其局限性。

有关部分原理和概念可翻阅本公众号前期推送，这里我们再简单描述一下Ct值的概念，即循环阈值数（Cycle threshold）：是指反应管内的检测荧光信号强度大于所设定的荧光阈值时的扩增循环数，其代表的是检测到的荧光信号强度高于最小检测水平（即荧光阈值）时的PCR循环数，其计算方法是坐标轴中扩增曲线和阈值线的交点对应的X轴的值。

Ct值的大小代表样本中核酸含量的多少，即Ct值越小，样本中核酸含量越多，Ct值越大，样本中核酸含量越少。核酸扩增检测作为指数级别的扩增，在理想的条件下，样本中核酸起始浓度的Log值与Ct值呈线性关系，所以当获得未知样本中的Ct值，就可以通过标准曲线（已知浓度的标准品同时扩增）计算出标本中的核酸浓度。用数学表达式可以简单表示为二元一次方程即Ct =k lgX₀ + b（k，b为常数，X₀代表核酸起始浓度），当扩增效率为100%，Ct值增加1时表示浓度降为原来的1/2，Ct值增加2时浓度降为原来的1/4，Ct值增加3.32（2^3.32=10）时浓度降为原来的1/10。当然，对于部分临床检测项目，不需要计算样本中的核酸浓度，只需要根据Ct值得到定性的检测结果即可。

“若Ct值大于35，理论上起始模板拷贝数小于1，可认为检测结果无意义”的说法很显然是不准确的。

说到这里，许多读者会有疑问，Ct值到底应该是多少？答案是不一定，因为不同检测系统的总循环数和阳性判断值不同。其次许多病原体感染属于自限性疾病，即机体可以通过免疫调节逐渐恢复并痊愈的过程，病原体在人体中的载量是一个变化的过程，从感染到恢复的过程，人体中的病原体载量可以简单理解为先升高再降低。以新冠病毒核酸检测为例，某样本的Ct值为38时，感染者可能是感染初期，也可能是恢复期；再比如，在基于PCR技术的部分肿瘤基因突变检测中，还会使用ΔCt值（即靶基因Ct值和外控管Ct值的差值）的概念来辅助判断检测结果。所以不论检测出的Ct值为多少，都是具有一定临床意义的。

根据Ct值的计算方法，基线和阈值线的改变会直接影响Ct值的大小，所以即使相同的样本，同一检测人员使用相同的仪器连续检测2次，也几乎无法得到相同的Ct值。其次在临床检测中，检测结果即扩增曲线也会受到检测全过程中各个要素的影响，包括检测前样本采集、运输和保存等，检测中的性能评估、人员操作、试剂仪器等，检测后的结果分析等，所以单独2次实验得到的Ct值几乎不具有可比性。如果要进行量化比较，就需要按照定量检测方法设置同批次标准品进行检测或跟踪Ct值的变化趋势。

综上，抛开检测项目、检测系统、报告方式和临床价值，单独的谈论Ct值的大小毫无意义。在核酸检测中，Ct值是帮助检测人员得到准确检测结果的重要参数但不是唯一参数，所以检测人员需要充分、正确地认识这一参数，不应“唯Ct值论”。